Силикагель как культуральная среда
Использование золей кремнезема в качестве среды для получения градиента плотности при разделении клеток и других биологических компонентов методом центрифугирования рассматривалось в гл. 4. Кроме того, при проведении биологических исследований кремнезем может применяться в качестве носителя или подложки культуральной среды. Такую кремнеземную подложку можно стерилизовать предварительной автоклавной обработкой, а при необходимости ее можно изготовлять в очень чистой форме, свободной от других неорганических или органических загрязнений.
Мюллер и Холм [391] описали подготовку силикагелевых пластинок для выращивания определенных типов бактерий. Золь кремневой кислоты получали добавлением раствора силиката натрия к буферному раствору соляной кислоты при рН~4,5. Силикагель помещали в чашки Петри, промывали, пропитывали питательным раствором и затем обрабатывали в автоклаве. Для получения особо чистой среды промежуточный золь можно было подвергнуть диализу перед тем, как он превращался в гель [392]. Улучшенный способ введения питательных веществ непосредственно в кремневую кислоту, из которой затем в стерильных условиях обазуется гель, что позволяет исключить стадию диализа, был разработан Стержесом [393]. Более простой способ [394] состоит в следующем. Смешивают 700 мл 0,5 н. раствора НС1 с 300 мл неорганического питательного раствора. К 1 ч. объема 0,5 н. раствора силиката натрия добавляют 1 ч. объема известковой воды и к этой смеси приливают 1 объемную часть кислого питательного вещества. Полученную смесь разливают в чашки Петри, подвергают старению в течение 2 ч и выдерживают в сушильной печи при 100°С в течение 1 ч. Ингельман и соавторы [395, 396] предложили использовать сложный тетраметиловый эфир ортокремневой кислоты. Для этой цели чистые золи кремнезема готовили ионным обменом, затем их стерилизовали и хранили для последующего применения. Добавление питательного раствора вызывало застудневание [397]. Синг [398] и Темпль [399] также использовали силикагель в качестве культуральной среды. Применение доступных коммерческих растворов коллоидного кремнезема заметно
43 Заказ № 250
Упрощает приготовление еиликагелевых сред. Воспроизводимый способ изготовления силикагелевой подложки из коммерческого золя для культуральных сред, содержащих различные типы питательных растворов, был детально описан Кингсбери и Барг - хорном [400]. Прамер [401а] подробно изложил условия получения гелей, очищенных от солей пропусканием раствора чистого кристаллического силиката натрия через ионообменник для удаления натрия и превращения продукта в силикагеле - вую культуральную среду. Бухагьяр [4106] описал способ очистки коммерческого коллоидного кремнезема, применяемого для приготовления определенных сред для выращивания микробиологических культур, а также условия гелеобразования.